A harmadik évadtól, Henry Ian Cusick karaktere, a skót katona Desmond David Hume, főszereplőként erősíti a csapatot, akárcsak Michael Emerson, aki a misztikus „Többiek” vezetőjét, Benjamin Linus-t (korábban „Henry Gale”) játssza. Három vadonatúj szereplővel is találkozhatunk: Elizabeth Mitchell-lel, mint Juliet, Kiele Sanchez-zel, mint Nikki, és Rodrigo Santoro-val, mint Paulo. Mr. Eko igen korán távozik az évadból.

Számos mellékszereplőnek ugyanakkora a szerepe, mint valamely főszereplőnek. A második évadban, Rose Henderson (L. Scott Caldwell) és a repülőgép farokrészének egy túlélője, Bernard Nadler (Sam Anderson) egy saját epizódot kapott, melyből a múltjuk egy szeletét is megismerhettük. Mira Furlan mint Danielle Rousseau, a francia nő szerepel. Néhányan a „Többiek” közül - beleértve Tom-ot (M. C. Gainey), Danny-t (Michael Bowen), Ethan-t (William Mapother), és Alex-et (Tania Raymonde) - nagyon fontos szerepet játszanak a történet alakulásában. Jack apja, Christian Shephard (John Terry), a légi utaskísérő, Cindy Chandler (Kimberley Joseph), és a békebíró, Edward Mars (Fredric Lane) a szigeten kívül több főszereplő múltjában is megjelenik.

Információk, amiket Damon Lindelof és Carlton Cuse adtak: A harmadik évadban megtudjuk, mi is történt valójában, mikor Desmond aktiválta a berendezést. Desmond tehát visszatér a történetbe. A nézők tudni akarják, miért volt börtönben, és hogy mi történt vele, Ekoval és Locke-kal, mikor elfordította a kulcsot… tudjuk, hogy a Sziget látható volt egy pillanatra a kulcs elfordítása közben, mint ahogy akkor is, mikor lezuhant a gép. A négyujjú lábszobor a Sziget múltjára, történelmére utal. Az új évad fényt derít rá, hogy mi történt a Szigeten, mielőtt a Dharma megérkezett a 70-es években, és hogy ki volt ott. A fekete füst is biztosan megjelenik majd.

A Többiek miért és hova vitték el Jacket, Kate-et és Sawyert? Ezekre a kérdésekre választ fogunk kapni az első 6 epizódban. Nagyobb hangsúlyt fektetnek majd a karakterek közti kapcsolatokra, mint a titkokra. Meg fogjuk tudni, hogy Locke hogyan került a tolószékbe, vagy hogy mit jelentenek Jack tetoválásai.

3 új szereplő bukkan fel a 3. évadban, valószínűleg azok a túlélők közül kerülnek ki, akik eddig háttérbe szorultak: egy 30-as nő vezetői képességekkel, egy 20 év körüli vonzó nő, és egy rejtélyes, 20 év körüli, latin-amerikai férfi.

Az új évad elsősorban a Többiekről fog szólni. A titokzatos Henry Gale (akit Michael Emerson alakít) csatlakozni fog rendszeres szereposztáshoz. Mr. Cuse elmondta, hogy a következő évad végére kiderül a Többiekről, hogy kik ők, hányan vannak és hogy mi a céljuk.

A harmadik évadban több szerepet kap a romantika - és a rejtélyes Többiek. „A Többiek az új évad egy fontos része, sok rejtély kapcsolódik hozzájuk, és sok kérdést vet fel a jelenlétük. A nézők kíváncsiak a válaszokra, ezért nézni fogják a harmadik évadot is.” - mondta egy interjúban Carlton Cuse producer. „És a dolgok, amiket fel fogunk tárni…” - kezdi Cuse - „Biztosan lesz néhány új karakter... Michael Emerson, aki Henry Gale-t játssza, jövőre fontos szerepet kap.” Megjelenik egy új karakter, aki sok rejtélyt fel fog tárni: Penelope Widmore, akit Sonya Walger alakít. [...] „A harmadik szériában a szeretet is megjelenik.” - mondta Bryan Burk producer - „A túlélők több mint 60 napja a szigeten vannak. Mostanra nyilvánvalóan megismerték egymást… A szeretet fogalma ott van, és… ez vezet minden embert a szigeten. A harmadik évadban ez sokkal nagyobb jelentőséget kap.”

Carlton Cuse elmondta: „A következő évad a Többiekről szól majd. Sok rejtélyt és kérdést hagytunk velük kapcsolatban, ezekre adunk választ. Alexet sokszor láthatjuk az új szériában.”

A Hollywood Riporter szerint a Lostban két új színésznő is fog feltűnni, hiszen a második évadban meghalt szereplőket (Ana Lucia és Libby) gyorsan pótolni fogják a sorozat készítői.

Ana-Lucia sem tűnik el teljesen a sorozatból, a nézők a többi túlélő visszaemlékezéseiben láthatják még. „Ana történetének vége. A nézők végül megtudhatják, mi történt Cindyvel.” – mondja Cuse.

Harold Perrineau (Michael) nem lesz állandó szereplő, már a második évadban sem volt az. Időnként megjelent (Walt miatt), de nem folytonos tagként.

Michael Emerson (Henry Gale) állandó szereplőként tér vissza a következő évadban.

A 3. szezonban új helyszínek és új karakterek jelennek meg. Felröppent a hír, hogy Desmond teljes értékű tagként csatlakozik a szereposztáshoz, de a producerek nem kommentálják. Az évad témája időszerűnek, tekeredőnek, és rémítőnek hangzik. Lindelof előrejelzése az új évaddal kapcsolatban: „Mi kontra ők. De ki az a ’mi’, és ki az ’ők’? Meg fogjuk tudni.”

Damon Lindelof: Libby rendkívül titokzatos háttértörténetet kapott, és ez csak a jéghegy csúcsa. Tudjuk, hogy Hurleyvel együtt voltak az elmegyógyintézetben, és a Michael gyilkossága előtt alkalma volt arra, hogy megmagyarázza, hogyan jutott oda… van egy remek tervünk, hogyan fogjuk elmesélni a történetet. A nézők a következő évad során visszaemlékezésekből fogják megtudni a válaszokat. Tehát nem vagyunk készen Cynthiával, de Libby halott.

Lindelof & Cuse: Malcolm David Kelly (Walt) növekedését kísérhetjük végig a harmadik évadban. Rousseau-ból is többet láthatunk majd jövőre. A kutatóhajója története is megjelenik, de nem garantált, hogy sokat megtudunk róla. Új karaktereket fognak bemutatni a harmadik évadban, úgyhogy egészen új visszaemlékezéseket láthatunk. Az eredeti karakterek visszaemlékezéseiből valószínűleg sokkal kevesebbet kapunk. Jövőre a másik túlélők közül néhányról meg tudunk majd egyet s mást. Az új karakterekről szintén. Remélhetőleg a finálé végéig mindent megtudunk róluk.
Állítólag néhány színész háttérbe szorul majd, de ez nem azt jelenti, hogy nem fogjuk látni őket.

Javier Grillo-Marxuach producer elmondta: „A legnagyobb rejtély a szigeten a Dharma. Az új évadban többet tudhatunk meg róla. A ’Dharma Initiative’ egy kutatóintézet volt a szigeten. Tudósok és szabadgondolkodók jöttek a szigetre, hogy különböző kutatásokat végezzenek: pszichiátria, állattan – a tájékoztató filmben megemlítik az állattant is, a szigeten pedig jegesmedvéket láttak a túlélők. Állatfajokkal kísérleteztek, és pszichológiai kísérletek sorát végezték el embereken. A Dharma Initiative -t ketten alapították, olyan diákok, akik megpróbáltak végére járni emberi viselkedés rejtélyeinek. Hat bunkert létesítettek a szigeten, és ezekben végezték kutatásaikat. A Dharma rengeteg lehetőséget nyújt, hogy kíváncsivá tegyük a nézőt, mi is történt ott valójában, milyen kísérleteket végeztek. A Dharma azóta már valószínűleg tönkrement. Sok minden történt a szigeten, és ez még mind semmi...…”

Damon Lindelof: Lesz olyan visszaemlékezés is, ami megmagyarázza Jack tetoválását: mit jelent? Mikor kapta?